最近发现了python版的MCScan,是个大宝藏。由于走了不少弯路,终于画出美图,赶紧记录下来。

github地址 https://github.com/tanghaibao/jcvi/wiki/MCscan-(Python-version)

  • 软件安装

  •  1 ## 安装lastal
    2 网址:http://last.cbrc.jp
    3 unzip last-1060.zip
    4 cd last-1060
    5 make
    6
    7 # 把scripts, src 添加到环境变量
    8
    9 ## jcvi
    10 pip install jcvi
    11
    12 ## 若出现 from rillib.parse import urlparse 缺少parse模块,则装parse模块,然后将urllib.parse 改为urlparse; 因为urlparse模块在Python 3中重命名为urllib.parse,所以模块在Python 2.7下应该使用urlparse。
  • 输入数据

      • gff文件转bed格式

      •  1 ## 以spinach,和sugar为例子
        2 python -m jcvi.formats.gff bed --type=mRNA --key=ID spinach_gene_v1.gff3 -o spinach.bed
        3 python -m jcvi.formats.gff bed --type=mRNA --key=ID BeetSet-2.unfiltered_genes.1408.gff3.txt -o sugar.bed
        4
        5 ##参数
        6 --type:gff文件中第三列
        7 --key:type对应的第九列信息前缀
        8
        9 我们分析只需要用到每个基因最长的转录本就行,在sugar中是以多个转录本进行存储,因为需要获取最长转录本
        10
        11 ## 将sugar中bed进行去重复
        12 python -m jcvi.formats.bed uniq sugar.bed
      • 获取cds/pep序列

      • 1 ## cds和pep序列均可以进行共线性分析
        2 ## 根据上述得到的.bed文件调取对应cds和蛋白序列
        3 # spinach
        4 seqkit grep -f <(cut -f4 spianch.bed) spinach.cds.fa | seqkit seq -I >spinach.cds
        5 seqkit grep -f <(cut -f4 spianch.bed) spinach.pep.fa | seqkit seq -I >spinach.pep
        6
        7 # sugar
        8 seqkit grep -f <(cut -f4 sugar.uniq.bed) BeetSet-2.genes.1408.cds.fa | seqkit seq -i >sugar.cds
        9 seqkit grep -f <(cut -f4 sugar.uniq.bed) BeetSet-2.genes.1408.pep.fa | seqkit seq -i >sugar.pep
      • 小知识:也可以根据gff文件,基因组ref.fa文件中直接调取cds,和pep序列

      • 1 ## 需要安装cufflinks
        2
        3 ## 提取cds
        4 gffread in.gff3 -g ref.fa -x cds.fa
        5
        6 ## 提取pep
        7 gffread in.gff3 -g ref.fa -y pep.fa
  • 共线性分析

  •  1 ## 新建一个文件夹,方便在报错的时候,把全部都给删了
    2 mkdir cds && cd cds
    3 ln -s ../sugar.cd ./
    4 ln -s ../sugar.uniq.bed ./sugar.bed
    5 ln -s ../spinach.cds ./
    6 ln -s ../spinch.bed ./
    7
    8 ## 运行代码
    9 python -m jcvi.compara.catalog ortholog (--dbtype prot[蛋白分析]) --no_strip_names spinach sugar
    10
    11 结果:
    12 spinach.sugar.anchors:共线性block区块(高质量)
    13 spinach.sugar.last:原始的last输出
    14 spinach.sugar.last.filtered:过滤后的last输出
    15 spinach.sugar.pdf:点阵图
    16
    17 ## 如果遇到报错,多半是要安装python包,更新Latex
  • 可视化

      • 共线性图

      •  1 ## 首先生成.sinple文件
        2 python -m jcvi.compara.synteny screen --minspan=30 --simple spinach.sugar.anchors spinach.sugar.anchors.new
        3
        4 ## 编辑配置文件seqids 和layout
        5
        6 #设置需要展示染色体号
        7 vi seqids
        8 chr1,chr2,chr3,chr4,chr5,chr6 #spinach
        9 Bvchr1.sca001,Bvchr2.sca001,Bvchr3.sca001 #sugar
        10
        11 # 设置颜色,长宽等
        12 vi layout
        13 # y, xstart, xend, rotation, color, label, va, bed
        14 .6, .1, .8, 0, red, spinach, top, spinach.bed
        15 .4, .1, ,8, 0, blue, sugar, top, sugar.bed
        16 # edges
        17 e, 0, 1, spinach.sugar.anchors.simple
        18
        19 注意, #edges下的每一行开头都不能有空格
        20
        21 ## 运行代码
        22 python -m jcvi.graphics.karyotype seqids layout

  • 若要突出显示某一共线性则可以在对应的位置添加g*

  •  1 vi spinach.sugar.anchors.simple
    2 g*Spo03717 Spo03716 Bv3_048620_odzi.t1 Bv3_049090_cxmm.t1 46 +
    3 Spo17356 Spo17350 Bv1_001140_tedw.t1 Bv1_001540_xzdn.t1 41 -
    4 Spo13685 Spo13730 Bv5_123480_yfcy.t1 Bv5_123900_rucq.t1 46 -
    5 Spo26250 Spo26280 Bv5_117270_qhwj.t1 Bv5_117680_iykf.t1 36 +
    6 Spo19005 Spo06982 Bv7_173830_frmo.t1 Bv7_174150_pckw.t1 37 +
    7 Spo19374 Spo20559 Bv4_081440_riqq.t1 Bv4_081750_yeuy.t1 32 -
    8
    9 #运行
    10 python -m jcvi.graphics.karyotype seqids layout
      • 若要显示3个物种的共线性,则应两两比对,得到两个*.simple文件,并对其进行配置(来自https://www.jianshu.com/p/39448b970287)

      •  1 $ vi layout
        2 # y, xstart, xend, rotation, color, label, va, bed
        3 .7, .1, .8, 15, , Grape, top, grape.bed
        4 .5, .1, .8, 0, , Peach, top, peach.bed
        5 .3, .1, .8, -15, , Cacao, bottom, cacao.bed
        6 # edges
        7 e, 0, 1, grape.peach.anchors.simple
        8 e, 1, 2, peach.cacao.anchors.simple
        9
        10 $ vi seqids
        11 chr1,chr2,chr3,chr4,chr5,chr6,chr7,chr8,chr9,chr10,chr11,chr12,chr13,chr14,chr15,chr16,chr17,chr18,chr19
        12 scaffold_1,scaffold_2,scaffold_3,scaffold_4,scaffold_5,scaffold_6,scaffold_7,scaffold_8
        13 scaffold_1,scaffold_2,scaffold_3,scaffold_4,scaffold_5,scaffold_6,scaffold_7,scaffold_8,scaffold_9,scaffold_10r
        14
        15 $ python -m jcvi.graphics.karyotype seqids layout

      • 3个物种三角形排序配置文件(来自https://www.jianshu.com/p/f7971dbf5f85)

      •  1 # y, xstart, xend, rotation, color, label, va,  bed
        2 .5, 0.025, 0.625, 60, , Grape, top, grape.bed
        3 .2, 0.2, .8, 0, , Peach, top, peach.bed
        4 .5, 0.375, 0.975, -60, , Cacao, top, cacao.bed
        5 # edges
        6 e, 0, 1, grape.peach.anchors.simple
        7 e, 1, 2, peach.cacao.anchors.simple
        8
        9 #运行
        10 python -m jcvi.graphics.karyotype seqids layout

除此之外,Tbtools也可以完成类似图片,对于新手来说更加容易上手,具体可查看以下内容

参考

1、其实MCScan画图也可以很好看

2、「JCVI教程」如何绘制CNS级别的共线性图(上)

3、「JCVI教程」如何绘制CNS级别的共线性图(中)

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