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随着測序技术的不断提高。二代測序数据成指数增长。

NCBI提供了SRA数据库存储这些数据。

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra

为了方便更好的分析这些数据,NCBI提供了下载的命令行工具:sra-toolkit。

包含下面命令:

官方文档:

http://trace.ncbi.nlm.nih.gov/Traces/sra/sra.cgi?view=toolkit_doc

prefetch: Allows command-line downloading of SRA, dbGaP, and ADSP data 下载数据

fastq-dump: Convert SRA data into fastq format # 将下载的sra数据转换为 fastq文件,支持 PE

sam-dump: Convert SRA data to sam format# sra转换为sam

sra-pileup: Generate pileup statistics on aligned SRA data

vdb-config: Display and modify VDB configuration information

vdb-decrypt: Decrypt non-SRA dbGaP data (“phenotype data”)

prefetch

经常使用命令
Data transfer:
# 假设已有下载的文件是否强制下载,默觉得非强制
-f | --force <value> Force object download. One of: no, yes, all. no [default]: Skip download if the object if found and complete; yes: Download it even if it is found and is complete; all: Ignore lock files (stale locks or if it is currently being downloaded: use at your own risk!). # 选择下载的方式 ascp 和 http,默认先尝试 ascp。再尝试http
--transport <value> Value one of: ascp (only), http (only), both (first try ascp, fallback to http). Default: both. # 列举 kart 文件里的 内容,大小
# 你能够把须要下载的项目放入 kart 文件
-l | --list List the contents of a kart file.
-s | --list-sizes List the content of kart file with target file sizes. # 设置文件的最小尺寸
-N | --min-size <size> Minimum file size to download in KB (inclusive). # 设置文件的最大尺寸
-X | --max-size <size> Maximum file size to download in KB (exclusive). Default: 20G. # 排序方式
-o | --order <value> Kart prefetch order. One of: kart (in kart order), size (by file size: smallest first). default: size.

样例

prefetch ERR732926

直接下载 ERR732926 样本的文件,默认放入 ~//ncbi/public/sra 文件夹下

prefetch cart_0.krt

下载 kart文件里的列表

prefetch -l cart_0.krt

列举cart_0.krt文件的内容

fastq-dump


General:
-h | --help Displays ALL options, general usage, and version information.
-V | --version Display the version of the program.
Data formatting:
#切割 paired-end data
--split-files Dump each read into separate file. Files will receive suffix corresponding to read number.
--split-spot Split spots into individual reads. # 仅仅保留fasta,没有质量得分
--fasta <[line width]> FASTA only, no qualities. Optional line wrap width (set to zero for no wrapping).
-I | --readids Append read id after spot id as 'accession.spot.readid' on defline.
-F | --origfmt Defline contains only original sequence name.
-C | --dumpcs <[cskey]> Formats sequence using color space (default for SOLiD). "cskey" may be specified for translation.
-B | --dumpbase Formats sequence using base space (default for other than SOLiD).
-Q | --offset <integer> Offset to use for ASCII quality scores. Default is 33 ("!").
Filtering:
-N | --minSpotId <rowid> Minimum spot id to be dumped. Use with "X" to dump a range.
-X | --maxSpotId <rowid> Maximum spot id to be dumped. Use with "N" to dump a range.
-M | --minReadLen <len> Filter by sequence length >= <len>
--skip-technical Dump only biological reads.
--aligned Dump only aligned sequences. Aligned datasets only; see sra-stat.
--unaligned Dump only unaligned sequences. Will dump all for unaligned datasets. # 输出数据
Workflow and piping:
-O | --outdir <path> Output directory, default is current working directory ('.').
-Z | --stdout Output to stdout, all split data become joined into single stream.
--gzip Compress output using gzip.
--bzip2 Compress output using bzip2.

样例

fastq-dump -X 5 -Z SRR390728

能够在不下载的情况下。显示SRR390728样本的前五个读段(20行)

fastq-dump -I –split-files SRR390728

处理 paired-end 文件

Produces two fastq files (–split-files) containing “.1” and “.2” read suffices (-I) for paired-end data.

fastq-dump –split-files –fasta 60 SRR390728

Produces two (–split-files) fasta files (–fasta) with 60 bases per line (“60” included after –fasta).

fastq-dump –split-files –aligned -Q 64 SRR390728

Produces two fastq files (–split-files) that contain only aligned reads (–aligned; Note: only for files submitted as aligned data), with a quality offset of 64 (-Q 64) Please see the documentation on vdb-dump if you wish to produce fasta/qual data.

列举出经常使用命令,假设有其它须要请阅读官方文档。

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