1)背景
处理基因组数据中，比较基因组不同区域，例如寻找overlap等，是一种基本的且常见的问题。虽然UCSC 中‘Table Browser’或者Galaxy可以用来处理，但是当这些工具面对大的数据的时候就会显得力不从心。因此，需要一款快速、灵活的软件来批量处理数据集。

bedtools是一款用C++编写的小巧且灵活的软件来处理这些复杂的问题，可以用来比较、操作、注释bed和gff文件中的genomic features。它设计主要是在linux环境下，可以和awk、grep、sort 等实现无缝对接，且支持bam格式文件，可以将bam文件转换为bed文件，因此对于大数据处理来说非常方便。

由于在版本在不断的更新，我们将依据最初版本的参考文献给出每个示例图，让大家知道理解每个命令的含义，知道如何去学习一个软件。明白了原理，具体要到的时候，依据不同版本的帮助文档就很容易上手。

2）功能

下图是bedtool的可用操作(注意版本不同，命令可能会变，但大致功能不会改变，这里主要是展示其原始文献)：虽然有些命令已经该换名字，例如fastaFromBed在后续的版本中的别名是getfasta，但是这些命令已经可以被执行，尽管后续版本不断有新的参数被加入。(在一再次注意，这里主要通过图解来说每个命令到底在做什么。不讲实际应用)

2.1）intersectBed

‘intersecting’ or ‘overlapping’指feature之间至少有1bp 的重叠：

基本用法：intersectBed [OPTIONS] [-a <BED> || -abam <BAM>] -b <BED>

2.1.1）找出overlap并输出

intersectBed  –a  A.bed  –b  B.bed

2.1.2）当有overlap输出原始的 “A” feature

intersectBed  –a A.bed –b B.bed -wa

2.2）pairToBed

主要用于将BedPE feature或者paired-end BAM alignment  与另一个bed文件比较寻找overlap

基本用法：pairToBed [OPTIONS] [-a <BEDPE> || -abam <BAM>] -b <BED>

2.2.1)默认情况下，如果任何一端与B有交集则输出A（Report A if either end overlaps B.）

2.2.2）-type 参数可以用来控制输出

-type both: 当用该参数的时候，只有在双端都和B有交集的情况下才输出A(Report A only if both ends overlap B)

-type neither: 如果双端和B都没有交集则输出A(Report A only if neither end overlaps B.)

-type ispan: 输出A，如果A双端间区域和B有重叠(Report A if it’s “inner span” overlaps B.)

2.2.3) -f参数通过调节最少比对长度来控制输出

输出A，如果一端至少有50%区域与B重叠(eport A only at least 50% of one of the two ends is overlapped by B)

pairToBed -a A.bedpe -b B.bed -f 0.5

2.3) pairToPair

寻找两个BEDPE文件之间的重叠

基本用法:pairToPair [OPTIONS] -a <BEDPE> -b <BEDPE>

2.3.1)默认情况下输出A，如果A和B都有链信息，且A的双端和B有交集

2.4）bamToBed

用来将bam格式转化为Bed格式

基本用法：bamToBed [OPTIONS] -i <BAM>  ，默认输出的bed 文件有6列

bamToBed -i RNA-seq.bam |head -6

2.5）windowBed

在用户指定的窗口内返回两个BED文件之间的overlap

基本用法:windowBed [OPTIONS] -a <BED> -b <BED> ,默认为上下游1M窗口

2.5.1）默认为上下游1M，例如：

2.5.2）可以通过(-l 和-r)参数来控制上下游，加入不同的window

2.6）closestBed

如果A和B之间没有overlap,则输出与A最近的B的信息

2.7）subtractBed

用处：主要输用于移除重叠部分及间隔区

基本用法：subtractBed [OPTIONS] -a <BED> -b <BED>

默认情况下

2.8）mergeBed

主要用于将重叠的feature合并

基本用法：mergeBed [OPTIONS] -i <BED>

例如：

、

2.9）coverageBed

主要是统计一个BED文件中要素相对于另一个的覆盖深度和广度

基本用法：coverageBed [OPTIONS] -a <BED> -b <BED>

例如：统计结果解释可以参考下图。

2.10） genomeCoverageBed

对特征文件的覆盖情况进行统计

基本用法：genomeCoverageBed [OPTIONS] -i <BED> -g <GENOME>

2.11）fastaFromBed

用于提取fasta文件中，与bed文件中匹配的序列，形成一个新的fasta文件

基本用法：fastaFromBed [OPTIONS] -fi <input FASTA> -bed <BED> -fo <output FASTA>

2.12）maskFastaFromBed
用于将bed 中指定的位置在fasta中进行mask
基本用法：maskFastaFromBed [OPTIONS] -fi <input FASTA> -bed <BED> -fo <output FASTA>

默认情况下是硬soft，而不是软soft

2.13) shuffleBed
用于置换feture在染色体中的location
shuffleBed [OPTIONS] -i <BED> -g <GENOME>

2.14)sortBed

对bed文件进行排序
基本用法：sortBed [OPTIONS] -i <BED>

默认情况下，对bed文件按照染色体，然后按照起始位置。

2.15）linksBed

为bed 文件建立html

基本用法：linksBed [OPTIONS] -i <BED> > <HTML file>

例如:

2.16）complementBed
输出在bed 文件中不包含的区域
基本用法：complementBed [OPTIONS] -i <BED> -g <GENOME>

例如

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