Ribosome profiling|N-terminomics|蛋白质基因组学

生物医学大数据-蛋白质基因组学：质谱注释

蛋白质组与其他组学的关系便是互为印证：蛋白质基因组学原本用于基因组注释，后面扩展到蛋白质与转录组或可变剪接之间关系，同时，蛋白质组依赖于基因组注释作为验证。许多研究未标明蛋白质基因组学，而是归属于对应的组学。

蛋白质基因组学现存问题：

基因组注释方法：1.Denovo。2.与转录组相应证。3.与基因组数据库同源比对。

基因组注释问题：

对于特定结构：

1. 起始位点定位信号难以确定
2. 确定promoter调控结合位点，错误率高
3. 终止位点不被注释
4. 可变剪接预测和确认上需要更多基因组的训练数据，使用denovo可以全部预测出来，但是用内含子和外显子仅能预测60%。

对于基因组的常规部分：

1. 因为二代reads短所以难拼接
2. 以前是鉴定已经存在的基因组，现在是未知物种的genome
3. 同类数据不同处理有不同结果
4. 人员水平不齐

对于蛋白质组大量质谱数据没被充分解析，可能的原因是

1. 蛋白质多种修饰
2. 搜索引擎差异
3. 其它电荷没鉴定
4. 数据库数据不足

没有充分解析造成许多没鉴定出来的数据，这些数据有可能是

1. 噪音
2. 实验污染，通过加入污染蛋白证实这部分是实验污染，当然鉴定出来之后也会舍弃这部分，对于该部分问题需要改进质控方法。
3. 产生混合图谱（即多肽段在同一个图谱）或者融合肽段
4. 在已知信息库中未收录的蛋白，即新蛋白

蛋白质基因组学的作用：

1.修正基因模型，即增加新注释，增加新肽段2.反过来由新肽段增加新基因

蛋白质基因组学需要提高的方法

蛋白质实验方面：

1. 提高分离技术使蛋白质分的开
2. 提高富集技术使得蛋白质量变大
3. 高精度仪器
4. 提高样本多样性，收集来源于不同时间空间的样本

数据库及数据处理方面：

常规部分存在的问题是大数据库存有大量噪音和相似，数据六位翻译结果搜索空间和denovo差不多。可以通过限制外显子大小，保留高分和正负库方法改进。质量评估时采用多段鉴定。假阳性高，动态范围宽，难鉴定可变剪接（可变剪接来源于denovo大数据库），重拼接假阳性高。

搜索速度方面：

质量过滤低质量、图谱聚类、去重或计算机并行的方法改良检索速度。

新方法：

加入RNAseq比对多重验证。

分成亚细胞组分多种方法鉴定。

体外转录翻译来验证

 

n-末端组学：使用对角线色谱查肽段末端

DNA和RNA数据辅助蛋白质鉴定

核糖体谱