Pysam 处理bam文件
Pysam可用来处理bam文件
安装:
用 pip 或者 conda即可
使用:
Pysam的函数有很多,主要的读取函数有:
AlignmentFile:读取BAM/CRAM/SAM文件
VariantFile:读取变异数据(VCF或者BCF)
TabixFile:读取由tabix索引的文件;
FastaFile:读取fasta序列文件;
FastqFile:读取fastq测序序列文件
一般常用的是第一个和第二个。
例子:
1 import pysam
2
3 bf = pysam.AlignmentFile("in.bam","rb"); 其中r = read, b:binary. 二进制文件。 bam文件index
bf是一个迭代器,可以next()或者for读取
1 for i in bf:
2 print i.reference_name,i.pos,i.mapq,i.isize
结果:
1 ctg000331_np121 144935 27 -284
2 ctg000331_np121 144940 48 291
3 ctg000331_np121 144941 48 309
4 ctg000331_np121 144944 48 255
5 ctg000331_np121 144946 27 -370
6 ctg000331_np121 144947 27 -346
i.reference_name代表read比对到的参考序列染色体id;
- i.flag bam的flag值
i.pos代表read比对的位置;
i.mapq代表read的比对质量值;
i.isize代表PE read直接的插入片段长度,有时也称Fragment长度;
很多功能见下图:
** pysam中的坐标位点是0开始,染色体起始位置为0,不是1
1 ## sam 文件依次对应的12列
2 r.qname: reads 名
3 r.flag :Flag
4 r.reference_name: 比对到的染色体
5 r.pos+1: 比对位置,必须得加一
6 r.mapq: 比对质量
7 r.cigarstring: CIGAR
8 r.next_reference_name:另外一条reads比对的参考基因组,若和第一条相同,则输出=
9 r.mpos+1: 比对的位置,必须得加1
10 r.isize: 插入片段长度
11 r.seq:reads seq
12 r.qual: reads 质量
一些功能:
- check_index()
检测index文件是否存在存在即为true
1 bf.check_index()
2 True
- close()
用完记得关闭
1 bf.close()
- count(self,contig=None, start=None, stop=None, region=None, until_eof=False, read_callback='nofilter', reference=None,end=None)
计算目标区域内比对上的reads数目
1 bf.count(contig="ctg000331_np121", start=1, stop=6000)
2 24
- count_coverage(self, contig=None, start=None, stop=None, region=None, quality_threshold=15, read_callback='all', reference=None, end=None)
计算目标区域内的覆盖度。返回1个4维的array,代表ACGT的覆盖度,而每个维度的array长度为100,里面的数字代表该碱基在各个位置上的覆盖度。
1 bf.count_coverage(contig="ctg000331_np121",start=1,stop=100)
- fetch(self, contig=None, start=None, stop=None, region=None, tid=None, until_eof=False, multiple_iterators=False, reference=None, end=None)
提取出比对到目标区域内的全部reads。返回的是一个迭代器,可以通过for循环或者next函数从中取出reads,我们使用next()函数取出第一条reads,reads是用 AlignedSegment对象表示,可以通过该对象的内置方法再对这条reads进行一些查询操作。
1 allreads=bf.fetch(contig="ctg000331_np121",start=1,stop=10000)
2 是一个迭代器,可以用for循环获得
- get_index_statistics(self)
通过index统计该BAM文件中在各个染色体上mapped/unmapped的reads个数
1 bf.get_index_statistics()
- fetch函数定位特定区域
有时候我们并不需要遍历整一份BAM文件,我们可能只想获得区中的某一个区域(比如chr1中301-310中的信息),那么这个时候可以用Alignmen模块中的fetch函数:
bam文件必须要index
1 for r in bf.fetch('chr1', 300, 310):
2 print r
3 bf.close()
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参考
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